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學(xué)做實驗的方法初步入門-迷你離心機技術(shù)文章
實驗方法:學(xué)做實驗兩者方法有所不同,大概分為兩種方法:向別人學(xué)習(xí)和自學(xué)。下面分別介紹一下吧
基本操作和基礎(chǔ)知識
在開始學(xué)做實驗的時候,有人指導(dǎo)。做實驗的內(nèi)容,大概分為基本操作和具體實驗的操作?;静僮魇蔷唧w實驗的基礎(chǔ),例如:怎樣量取容積,怎樣測量和調(diào)節(jié)PH值,怎樣清洗實驗室器皿,無菌操作技術(shù),怎樣使用pipette,怎樣配置溶液,怎樣autoclave(高壓蒸汽滅菌)等。學(xué)做實驗的時候,應(yīng)該先學(xué)zui基本的操作,再學(xué)具體的實驗。這些基本操作具有至關(guān)重要的作用,它直接決定了實驗的成功率。
可以推薦幾本基本關(guān)于實驗操作的書。*本書是《分子生物學(xué)實驗室工作手冊》(英文名At the bench: a laboratory navigator)。這本書是生物醫(yī)學(xué)研究生的入門書籍,建議精讀三遍以上。本書中譯本大約300多頁,相對于將要介紹的其它幾本書籍要薄很多。它介紹了怎樣在實驗室與他人相處,怎樣建立實驗室,怎樣寫實驗記錄,實驗室的基本操作如試劑的配置、儲藏和處理,無菌技術(shù),細(xì)胞培養(yǎng),離心,測PH值,電泳,顯微鏡的使用等??偠灾緯旧夏依松镝t(yī)學(xué)實驗室日常遇到的問題和所有的基本操作,是生物醫(yī)學(xué)研究生的入門書籍。
第二本書是《分子克隆》(英文名Molecular cloning: a laboratory manual),本書被譽為分子生物學(xué)的圣經(jīng),幾乎每一個生物實驗室都有一本。本書介紹了分子生物學(xué)常用實驗技術(shù)的基本原理和許多protocol。目前已經(jīng)出版到第三版。*版出版于 1982年,第二版出版于1989年,第三版出版于2001年。書中提供的protocol很經(jīng)典,但是有些目前已經(jīng)改進了。這本書很厚,第三版英文版有2000多頁,所以幾乎不可能也沒有必要精讀所有章節(jié),只要閱讀自己正在做的實驗的相關(guān)內(nèi)容就可以了。
《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》這本書從怎樣量取體積,稱取重量,測量PH值,測量濃度等zui基本的操作說起,講到配置溶液,細(xì)胞培養(yǎng),PCR,樣本的準(zhǔn)備,層析,電泳,印跡實驗,顯微鏡,酶促反應(yīng)(PCR等)。這本書共有737頁,講的是每天做實驗都要遇到的問題,詳盡系統(tǒng)卻又簡明易懂。對于希望學(xué)好做實驗的人而言,本書必須仔細(xì)閱讀,對于希望成為實驗高手的人而言,本書更應(yīng)該精讀。Current Protocol是Wiley出版社出版的一個實驗室手冊叢書,是生物醫(yī)學(xué)實驗經(jīng)典叢書之一,目前有16本,包括:Neuroscience, Molecular biology, Microbiology, Immunology, Toxicology, Cell biology等。
以上三本書各有特點?!禔t the bench: a laboratory navigator》為科普性質(zhì),是對實驗室基礎(chǔ)技術(shù)的粗略介紹,《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》是對實驗室基礎(chǔ)技術(shù)的詳細(xì)介紹,而《Molecular Cloning》則是對具體實驗的詳細(xì)介紹。按照“柿子先撿軟的捏”的原則,建議先通讀《At the bench: a laboratory navigator》,再通讀《Current Protocols in Essential Laboratory Techniques》1,2,3,5,9章及正在學(xué)習(xí)的具體實驗的相關(guān)章節(jié),加上閱讀《Molecular Cloning》正在學(xué)習(xí)的具體實驗的相關(guān)章節(jié)。通讀的時候,標(biāo)出重點及自己的知識盲點,以后多復(fù)習(xí)重點和知識盲點幾遍直至了然于胸。
怎樣向別人學(xué)做實驗
如果有人教做實驗,學(xué)習(xí)效率會高很多。無論是向老師還是向師兄師姐學(xué)習(xí),都需要注意別人的時間是寶貴的,所以盡可能一兩次學(xué)會。因此,在學(xué)習(xí)之前,先問清楚需要學(xué)習(xí)的實驗內(nèi)容,自己先通過閱讀書籍,查閱網(wǎng)絡(luò)資料對該實驗的原理和基本操作有一個大概的了解。好記性不如爛筆頭,在學(xué)習(xí)的時候,要帶上紙筆做記錄。遇到不懂的地方,不要因為覺得不禮貌而將疑問存于心中,而應(yīng)該詢問清楚。實驗的精髓不是一份簡單的Protocol,而是實驗的“心法”:關(guān)鍵步驟,注意事項,常見問題和解決方法。做任何一個實驗,必須清楚關(guān)鍵步驟、注意事項、常見問題和解決方法。要清楚一個試劑的作用是什么,加多或者少加會有什么后果;一個步驟的目的是什么,時間太長或者太短會怎樣等。在學(xué)習(xí)的時候,如果沒有教這些“心法”,自己應(yīng)該主動請教,并記錄下來。
一開始學(xué)做實驗的時候,分三步走:老師示范,自己做老師看,自己獨立做。認(rèn)真的態(tài)度常常使別人樂于教你,如果自己無所謂,則別人會覺得教你是在浪費時間。在開始學(xué)做一個實驗的時候,及時、詳細(xì)的實驗記錄是非常必要的,如果實驗失敗,這些記錄是分析失敗原因的重要依據(jù)。做完實驗之后,要總結(jié)經(jīng)驗教訓(xùn),記錄下來,并定期復(fù)習(xí)這些經(jīng)驗教訓(xùn)。總之,學(xué)做實驗,遵循的步驟是:1。 預(yù)習(xí)。2。觀摩,記錄。3。自己操作。4。總結(jié)和復(fù)習(xí)。*次實驗就成功,常常不是一件好事,因為可能僅僅是運氣好。多次失敗后的成功才是掌握了實驗的可靠指標(biāo)。好的實驗室常常有成熟的Protocol,不好的實驗室,Protocol可能并不完善,需要自己摸索和調(diào)整。
怎樣自學(xué)做實驗
不是每一個實驗都有人教,需要自學(xué)的情況很常見。自學(xué)做實驗,必須在掌握了實驗的基本操作的基礎(chǔ)上進行。自學(xué)實驗,關(guān)鍵是要找到可行的protocol,并清楚實驗原理,關(guān)鍵步驟,常見問題和解決方法。 我一般采取的程序是:首先用搜索引擎檢索實驗原理,常見問題,注意事項等。把網(wǎng)上許多文章拷貝下來,仔細(xì)閱讀,找出重點,總結(jié)成簡化版。然后,找一個好的protocol。Protocol可以從檢索,從書籍中找到,從別人的文獻中找,或者從生物公司的上找。這些方法下面分別介紹。找到不同的protocol進行比較,分析為什么不同。通過比較,可以加深對實驗的理解。
如果系里或者認(rèn)識的人有正在學(xué)習(xí)的實驗的專家,向?qū)<艺埥?,可以?jié)約不少時間。有時候,一個小小的細(xì)節(jié)問題就可以浪費許多時間。
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